Untersuchungen zur Rolle von Zytokinen bei der Beta-2-Mikroglobulin-Synthese in verschiedenen humanen Zelltypen

Vraetz, Thomas; Graeve, Lutz

doi:urn:nbn:de:hbz:82-opus-16410

Untersuchungen zur Rolle von Zytokinen bei der Beta-2-Mikroglobulin-Synthese in verschiedenen humanen Zelltypen

Vraetz, Thomas (Author)

2006

Verantwortlichkeitsangabevorgelegt von Thomas Graetz

ImpressumAachen : Publikationsserver der RWTH Aachen University 2006

Umfang147 S. : Ill., graph. Darst.

Aachen, Techn. Hochsch., Diss., 2006

Genehmigende Fakultät
Fak10

Hauptberichter/Gutachter
Graeve, Lutz (Thesis advisor)

Tag der mündlichen Prüfung/Habilitation
2006-09-14

Online
URN: urn:nbn:de:hbz:82-opus-16410
URL: https://publications.rwth-aachen.de/record/61519/files/Vraetz_Thomas.pdf

Einrichtungen

Medizinische Fakultät (510000-1)

Inhaltliche Beschreibung (Schlagwörter)
Amyloidose (Genormte SW) ; Mikroglobulin <beta-2-> (Genormte SW) ; Dialyse (Genormte SW) ; Interleukin 6 (Genormte SW) ; Interleukin 1 (Genormte SW) ; Interferon <gamma-> (Genormte SW) ; Interferon (Genormte SW) ; Interferon <alpha-> (Genormte SW) ; Medizin (frei) ; Bioinkompatibilität (frei) ; Zytokine (frei) ; Hämodialyse (frei) ; Beta-2-Mikroglobulin (frei) ; Amyloidose (frei) ; bioincompatibility (frei) ; cytokines (frei) ; haemodialysis (frei) ; beta-2-microglobulin (frei) ; amyloidosis (frei)

Thematische Einordnung (Klassifikation)
DDC: 610

Kurzfassung
Hintergrund: Proinflammatorische monozytische Zytokine wie Interleukin (IL-1), Tumor-Nekrose Faktor-alpha (TNF-alpha) und Interleukin-6 (IL-6) wurden für die Pathogenese der erhöhte Beta-2-Mikroglobulin (Beta-2-M)-Serumkonzentration bei Patienten mit chronischer Hämodialyse uner Verwendung von bioinkompatiblen Dialysemembranen verantwortlich gemacht. Bisher konnte jedoch weder die Quelle der erhöhte Beta-2-M-Serumkonzentration noch die genaue Rolle der Zytokine geklärt endgültig werden. Das Ziel der Arbeit war herauszufinden, ob die Zytokine, insbesondere IL-6, Regulatoren der Beta-2-M-Genexpression in humanen Hepatomzellen, T-Lymphozyten und Monozyten sind. Methoden: Humane Hepatomzelllinien HepG2 und HuH7, Jurkat T-Lymphozyten, monozytische MonoMac6-Zellen, primäre humane Monozyten und Synoviozyten wurden mit IL-1, IL-6, Interferon-alpha (IFN-alpha), IFN-gamma oder Lipopolysaccharid (LPS)-konditionierten Monozyten-Überständen stimuliert. Die Expression der Beta-2-M-mRNA wurde mit Northern Blot-Analysen untersucht, die Beta-2-M-Proteinsynthese wurde durch metabolische Markierung und Immunpräzipitationen analysiert und die Beta-2-M-Sekretion wurde mit einem Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) gemessen. Ergebnisse: In allen analysierten Zelltypen führte IFN-gamma und etwas abgeschwächter auch IFN-alpha zu einer Beta-2-M-Genexpression mit erhöhter Synthese und Sekretion von Beta-2-M-Protein. Weder IL-1-beta und IL-6 noch die LPS-konditionierten Monozyzenüberstände konnten eine Induktion der Beta-2-M-Genexpression auslösen, lediglich in HuH7-Hepatomzellen kam es zu einem leichten Anstieg nach Inkubation mit IL-1-beta. Schlussfolgerung: In dieser Arbeit konnte gezeigt werden, dass Interferone ein wihtiger Regulator der Beta-M-Expression sind. Es zeigte sich, dass monozytische Interleukin keinen direkten modulatorischen Effekt auf die Beta-2-M in Zellen mit hepatischen, monozytischen oder T-lymphozytischen Ursprungs haben. Ob es andere inflammatorische Einflüsse zur Bioinkompatibilität von Dialysemembranen gibt, wird in dieser Arbeit diskutiert.

Background. Proinflammatory monocytic cytokines such as interleukin-1 (IL-1), tumour necrosis factor-alpha (TNF-alpha) and IL-6 have been incriminated in the pathogenesis of elevated beta-2-microglobulin (beta-2-M) serum concentrations in patients undergoing haemodialysis with so-called bioincompatible dialyser membranes. However, neither the source of the elevated serum beta-2-M nor the precise role of monocytic cytokines in the expression of the beta-2-M gene have been elucidated conclusively. The aim of this study was to evaluate whether monoytic cytokines, and in particular IL-6, are regulators of beta-2-M gene expression in human hepatoma cells, T-lymphocytes and monocytes. Methods. HepG2 and HuH7 human hepatoma cells, Jurkat T-cells, monocytic MonoMac6 cells, primary human monocytes and synoviocytes were stimulated with IL-1-beta, IL-6, interferon-alpha (IFN-alpha), IFN-gamma or conditioned media from lipopolysaccharide (LPS)-treated monocytes. Expression of beta-2-M mRNA was analysed by Northern blotting, beta-2-M protein synthesis was determined by metabolic labelling and immunoprecipitation, and beta-2-M secretion was measured by an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results. In all cell types tested, IFN-gamma and, to a lesser extent, IFN-alpha stimulated gene expression of beta-2-M resulting in an increased synthesis and secretion of beta-2-M protein. Neither IL-1-beta and IL-6 nor supernatants from LPS-treated monocytes were capable of inducing beta-2-M gene expression, with the exception of a small increase in HuH7 hepatoma cells upon IL-1-beta treatment. Conclusions. The present study provides evidence that interferons are important regulators of beta-2-M expression. It also shows that proinflammatory monocytic cytokines do not modulate directly the expression of beta-2-M in cells of hepatic, monocytic and T-lymphocytic origin. Whether they are other inflammatory influences to the bioincompability of dialyser membranes is discussed in this study.

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