Zur Differenzierung hereditärer sensomotorischer Neuropathien mittels Mutationsanalyse des P0-Gens an Paraffin-eingebetteten Suralnervenbiopsien

Vitt, Cornelia Verena; Schröder, J. Michael

doi:HT013823354

Zur Differenzierung hereditärer sensomotorischer Neuropathien mittels Mutationsanalyse des P0-Gens an Paraffin-eingebetteten Suralnervenbiopsien

Vitt, Cornelia Verena (Author)

2003

Verantwortlichkeitsangabevorgelegt von Cornelia Verena Vitt

ImpressumAachen : Publikationsserver der RWTH Aachen University 2003

Umfang56 S. : Ill., graph. Darst.

Aachen, Techn. Hochsch., Diss., 2003

Genehmigende Fakultät
Fak10

Hauptberichter/Gutachter
Schröder, J. Michael (Thesis advisor)

Tag der mündlichen Prüfung/Habilitation
2003-07-24

Online
URN: urn:nbn:de:hbz:82-opus-6487
URL: https://publications.rwth-aachen.de/record/61788/files/Vitt_Cornelia.pdf

Einrichtungen

Medizinische Fakultät (510000-1)

Inhaltliche Beschreibung (Schlagwörter)
Medizin (frei) ; PO-Gen (frei) ; MPZ (frei) ; Charcot-Marie-Tooth-Erkrankung (frei) ; Dejerine-Sottas-Syndrom (frei) ; Kongenitale Hypomyelinisationsneuropathie (frei) ; HMSN (frei) ; PCR (frei) ; EMD-CE (frei)

Thematische Einordnung (Klassifikation)
DDC: 610

Kurzfassung
Bei den hereditären sensomotorischen Neuropathien (HMSN) handelt es sich um eine heterogene Gruppe genetisch determinierter Erkrankungen des peripheren Nervensystems. Eine definitive Diagnose bezüglich Subtyp der Erkrankung kann anhand klinischer und morphologischer Daten nicht immer gestellt werden. Deswegen sind molekulargenetische Untersuchungen von essentieller Bedeutung. Die vorliegende Arbeit befaßt sich mit Punktmutationen des P0-Gens, das maßgeblich an der Myelinisation des peripheren Nervensystems beteiligt ist. Die DNA von 43 Patienten wurde aus paraffin-eingebetteten Suralnervenbiopsien isoliert und per PCR amplifiziert. Zur Untersuchung auf Punktmutationen wurde die EMD-CE (Enzyme Mutation Detection Capillary Electrophoresis) durchgeführt. Diese Methode bedient sich einer Resolvase, eines Enzyms, das DNA im Falle von durch Punktmutationen verursachten Unregelmäßigkeiten schneidet. Die resultierenden Fragmente wurden auf dem ABI PRISM 310 per Kapillarelektrophorese detektiert. Auffällige Proben wurden zur weiteren Spezifizierung der Mutationen einer Sequenzierungsreaktion zugeführt. In vier Fällen gelang der Nachweis einer jeweils unterschiedlichen Punktmutation: In einem Fall wurde die in der Literatur noch nicht beschriebene Punktmutation Ala237Thr detektiert, was die auf klinischen und morphologischen Daten basierende Diagnose einer CMT2 bestätigt. Die untersuchten Familienangehörigen waren genotypisch unauffällig. Eine Glycin206stop-Punktmutation fand sich in Exon 5. Der Patient wies sowohl klinische Merkmale einer Hypomyelinisation als auch einer mitochondrialen Myopathie auf. Es handelt sich hierbei um den ersten Fall in der Literatur, für den eine solche Kombination einer HMSN mit einer mitochondrialen Myopathie beschrieben wird. Bei zwei weiteren Patienten wurden Polymorphismen in Exon 5 beziehungsweise Exon 6 detektiert, die nicht zu einer Änderung der Aminosäuresequenz führen und damit als nicht pathogen einzustufen sind.

HMSN is a heterogenous entity of genetically determined disorders of the peripheral nervous system. Clinical and morphological data sometimes do not allow to come to a definite diagnosis regarding the subtype of the disease. Therefore, genetic investigations are essential. The present dissertation focuses on point mutations in the P0 gene which plays a major role in myelination of the peripheral nervous system. The DNA of 43 patients was extracted from paraffin embedded sural nerve biopsies and amplified by PCR. To screen for point mutations Enzyme Mutation Detection Capillary Electrophoresis (EMD-CE) was used. This method is based on a resolvase, an enzyme which cleaves the DNA in case of irregularities caused by point mutations. The resulting fragments were detected on the ABI PRISM 310 by capillary electrophoresis. In addition to that Sequencing Analysis was used to specify the mutations. Four different mutations were found: In one case genetic analysis revealed a novel Ala237Thr exchange in exon 6. The diagnosis of CMT2, based on clinical and histological data, could be confirmed. The mutation could not be found in any the patient´s relatives. One point mutation resulting in a Glycin206stop codon was detected in exon 5. The patient showed both signs of hypomyelination such as mitochondrial myopathy. No similar combination of mitochondrial myopathy and HMSN has been reported in literature. In two other patients different polymorphisms were detected, located in exon 5 respectively 6 of the P0 gene, not leading to a change in the amino acid sequence and therefore not playing a pathogenous role.

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